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细胞培养步骤
复苏细胞:从液氮灌中或-80°C冰箱中查找到需要复苏的细胞，水浴锅提前打开预热 37°C。
1) 将查找到的冻存细胞在 37°C水浴中迅速摇晃解冻;
2) 将冻存管中的细胞移至含 5ml 完全培养基的离心管中，1000rpm 离心 5min;
3) 弃去上清液，补加 4-6mL 完全培养基后吹匀，接种于 T25 培养瓶中(或 6cm 皿中)， 培养过夜，第二天换液并检查细胞密度。
细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
1) 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次;
2) 加 1-2mL 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于 37°C培养箱 中消化 2-3min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落， 迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后，加 5ml 以上含 10%血清的完全培养基终止消化;
3) 轻轻吹打细胞，完全脱落后吸出至离心管中，1000rpm 离心 5-8min，弃去上清液， 补加 1-2mL 完全培养基后吹匀;
4) 按 5-6mL/瓶补加完全培养基，将细胞悬液按 1:2 到 1:3 的比例分到新的含 5-6 mL 完全培养基的培养皿中或者培养瓶中。
(即 1 个 T25 传代接种至 2~3 个 T25 或者 2~3 个直径为 6cm 的培养皿)
细胞冻存:细胞收集参照传代步骤 1~2，按冻存数量加入无血清冻存液后直接放-80°C 冰箱过夜，后续可转入液氮罐中长期保存。