免疫荧光（Immunofluorescence，IF）
免疫荧光（Immunofluorescence, IF）是利用特异性抗体标记细胞内靶蛋白，通过荧光显微镜观察蛋白定位、表达水平的经典细胞生物学实验技术。本训练完整覆盖免疫荧光全套流程，解决荧光淬灭、非特异性染色、背景高、信号弱等常见问题，帮助学员掌握标准化 IF 实验，可用于亚细胞定位、共定位、蛋白表达定性观察。
学习目标
理解免疫荧光实验原理，区分直接免疫荧光与间接免疫荧光
掌握细胞铺片、固定、透膜、封闭、一抗二抗孵育整套操作
学会 DAPI 核染、封片操作，规避荧光淬灭
熟悉荧光显微镜成像参数设置
能够排查高背景、无特异荧光、非特异染色、荧光淬灭等常见故障
掌握实验图片整理，满足论文配图标准
课程大纲
免疫荧光（IF）原理、直接法与间接法选择
细胞爬片制备、细胞铺板要点（冰冻切片、石蜡切片组织处理）
固定、透膜、封闭条件优化
一抗选择、稀释比例、孵育条件设置
荧光二抗孵育操作与避光注意事项
DAPI 细胞核染色、封片流程
荧光显微镜上机拍照、参数调节
常见问题排查：背景过高、无信号、荧光淬灭、非特异染色
图片处理、论文发表级图像规范
适合人群
生物、医学相关硕博研究生、实验技术员，需要做蛋白亚细胞定位、细胞表型观察，免疫荧光实验反复失败，希望建立标准化操作流程。
课程时长
2 天（理论 + 实操 + 图像分析）