实时荧光定量PCR（Quantitative real‑time PCR，qPCR）
本训练聚焦实时荧光定量 PCR (qPCR) 完整实操体系，从原理理解、引物设计、反应体系配制、上机设置，到数据解析、熔解曲线判读、相对 / 绝对定量计算，解决引物非特异性扩增、Ct 值异常、复孔差异大等常见科研坑点，适合分子生物学方向科研人员、研究生快速掌握 qPCR 标准化实验流程。
学习目标
掌握 qPCR 基础原理，区分染料法与探针法的适用场景
学会引物设计、内参基因筛选、样本 RNA 质控要点
熟练配置 qPCR 反应体系，掌握仪器参数设置
读懂扩增曲线、熔解曲线，能排查无扩增、拖尾、非特异峰等故障
熟练 2‑ΔΔCt 法进行基因相对表达量计算与图表输出
课程大纲
qPCR 原理与实验方案设计
RNA 提取、反转录样本前处理质控
qPCR 引物设计、验证与内参选择
反应体系配制、上机操作实操
扩增曲线、熔解曲线结果判读
2‑ΔΔCt 定量数据分析
常见问题排查：Ct 偏高、无扩增、复孔离散、引物二聚体
数据整理、论文图表规范输出
适合人群
生物医学、分子生物学相关硕博研究生、实验技术员，需要开展基因表达定量实验，想要规范 qPCR 实验，减少实验重复踩坑。
课程时长
1 天实操训练（理论 + 动手实操 + 数据分析）