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IF 染色

免疫荧光(IF)基于抗原抗体特异性结合,搭配荧光标记二抗,直观展示目标蛋白在细胞、组织中的定位、表达量及共定位关系,成像对比度高、可视化效果强,常用于蛋白亚细胞定位、细胞分型、信号通路研究及多靶点同步检测。

IF 染色
1、样本前处理
对细胞爬片、冰冻切片、石蜡切片进行固定、通透、封闭,消除非特异性荧光干扰。
2、抗体孵育
依次孵育一抗、荧光标记二抗,严格控制温育时长与环境,保证结合特异性。
3、核染色
使用 DAPI/Hoechst 等染料标记细胞核,辅助区分细胞结构与形态。
4、荧光成像
采用荧光显微镜 / 共聚焦显微镜拍摄明场、单通道及多通道叠加图像。
5、数据分析与交付
完成荧光强度分析、蛋白定位描述、共定位分析,返还切片、原始图片及实验报告。